뇌척수액 바이오 마커 분류

20 18 임상 신경학 수첩. 바이오 마커 연구에서 뇌척수액의 응용

뇌척수액 (CSF) 의 다양한 성분은 다양한 목적의 바이오메트릭 연구와 신경계 질환의 진단, 예후, 모니터링 및 식별을 위한 중요한 단서에 사용될 수 있다. 현재 다발성 경화 진단과 AD (tau 단백질 표현 수준과 인산화 수준) 진단에 널리 사용되고 있다.

뇌척수액은 요추천자를 통해 얻어져야 하고, 창조적인 샘플링에 속하기 때문에, 뇌척수액 샘플은 다른 샘플 (예: 혈액) 에 비해 특히 소중하다.

세 가지 주요 단백질 표시가 있습니다.

단백질 표지물의 일반적인 분석 방법: ELISA (특정 알려진 단백질의 경우) 와 프로테오믹스 (단백질 분광학). 뇌척수액의 단백질 농도는 혈장 속 단백질 농도보다 200 배 정도 낮기 때문에 고감도의 방법으로 검사해야 한다.

대사산물은 세포 대사의 종산물 또는 중간산물로 에너지 변환, 신호전도, 표면 손질 등의 과정에 참여한다. 뇌척수액에서 가장 많이 사용되는 대사 표지물은 포도당 함량으로 감염, 염증, 악화 등의 과정의 표지물로 쓰인다.

대사조직학 방법: 스펙트럼은 많은 생물 샘플 중 다른 대사물을 분석할 수 있다. 핵 자기 공명 분광학.

정상 세포가 시들면 cfDNA 를 방출하고, 외주혈 cfDNA 는 보통 150-200bp 입니다. 뇌척수액의 CfDNA 는 주로 악성 종양의 체세포 돌연변이나 병원체 감염을 감지하는 데 쓰인다. 종양세포가 방출하는 cfDNA 의 길이 범위는 더 넓어서 체세포 돌연변이를 탐지하는 데 직접 사용할 수 있다. CNS 감염 병원체 후 병원체 출처의 cfDNA 감정 병원체 이용 가능.

검출 방법: PCR (점 돌연변이) 또는 전체 게놈 시퀀싱.

MiRNA 는 내원성 비코딩 RNA 로, mRNA 조절에 참여하고 각종 세포 과정을 매개하는데, 보통 22 ~ 24 개의 핵산이 자라고 머리핀 구조가 있다.

다발성 경화증, AD, 외상, 중추 신경계 종양 등 많은 신경 퇴행성 질환은 모두 miRNA 이상 표현의 보도를 가지고 있다.

검출 방법: RT-PCR/qRT-PCR (특정 mirna 용); 2 세대 시퀀싱 (새로운 miRNA 용)

외래체는 복잡한 RNA 와 단백질을 함유한 작은 소포 (30- 150nm) 를 가리킨다. 현재 외래체는 지름이 30- 100 nm 인 디스크 모양의 주머니입니다. 1983 년 양망직적혈구에서 처음으로 외분비체가 발견되었고, Johnstone 은 1987 년에 그것을' 외분비체' 라고 명명했다.

다양한 세포가 정상과 병리 조건 하에서 모두 외분비체를 분비할 수 있다. 주로 리소좀 입자가 세포 안에 함몰되어 형성된 낭포에서 유래한 것으로, 체외와 세포막이 융합된 후 세포외 기질로 방출된다. 여기에는 DNA, 다양한 유형의 RNA, 지질, 단백질 및 대사 분자가 포함되어 있습니다.

배양된 모든 세포 유형은 외분비체를 분비할 수 있으며, 외분비체는 혈액, 침, 소변, 뇌척수액, 유즙을 포함한 체액에 자연적으로 존재한다. 외래체는 특정 분비막 소포로 세포 간 통신에 참여하는 것으로 보고 있다.

세포 외낭 (1-2um) 과 외래체 (30- 100nm) 는 신경 퇴행성 질환과 악성 종양 바이오마커 연구의 핫스팟으로 여겨져 왔다.

방법: 과속 원심력으로 외래체를 얻어서 mRNA 나 DNA 를 추출한다.

저자는 뇌척수액 성분의 광범위한 불안정성을 소개하고 분석 결과에 영향을 미치는 요인이 많다고 지적했다. 환자 관련 요인과 환경 (실험 치료) 요인의 두 가지 범주로 나뉜다.

대조군에 따라 포함 기준이 다르며 임상 기준과 실험실 기준 (표 1.4) 으로 구성됩니다.

QAlb: 혈장과 뇌척수액 사이의 단백질 농도 그라데이션은 혈액-뇌척수액 장벽 작용으로 인해 발생하는데, 뇌척수액에서 글로불린과 알부민 비율의 변화를 단백질상이라고 합니다.

현재 일반적으로 사용되는 프로테오믹스 방법은 질병의 초기 CSF 와 말기 조직을 비교하여 새로운 표지물을 식별한다. 예를 들어, 단백질 스펙트럼은 일반적으로 사용되지만, 현재 임상에 사용할 수 있는 표지물은 매우 적다. 주로 두 가지 점, 즉 현재 단백질 스펙트럼의 민감도가 제한되어 있기 때문이다. 둘째, 뇌척수액의 단백질 함량은 매우 낮다.

또 다른 방법은 다양한 항체 또는 어댑티브 기반 칩을 사용하여 항체 감도를 높이는 것입니다. 이 칩은 1000 종 이상의 단백질을 감지할 수 있다. 또는 조직학 분석을 통해 차별적으로 표현된 단백질을 찾아 CSF 에서 검출할 수 있습니다. 용해성과 분비 아형을 근거로 CSF 에 단백질이 있는지 예측할 수 있습니다.